检测出铜绿假单胞菌时抗生素的使用问题有哪些？

陈 桥

成都市新津县中医医院 检验科 四川 成都 610000

抗生素是一种由高等动植物或者微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体或者其他活性的次级代谢产物，可以对其他生活细胞的发育功能造成干扰。目前临床上常使用的抗生素主要包括化学方法合成或者半合成的化合物和微生物培养液中的提取液。如果检测出铜绿假单胞菌，在使用抗生素的时候就要格外注意。

1 铜绿假单胞菌的生物学特性

铜绿假单胞菌是一种很常见的条件致病菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。铜绿假单胞菌的菌体细长，且长短不同，有的情况下呈现线状或者球杆状，短链状或者成对排列。铜绿假单胞菌的菌体一端有单鞭毛，在相差显微镜或者暗视野显微镜下可以观察到细菌的活动。铜绿假单胞菌是一种专性需氧菌，它的生长温度是在25-42℃，在25-30℃的温度下最适宜铜绿假单胞菌生长。铜绿假单胞菌在普通的培养基上就可以生存，并且还可以产生水溶性色素，比如带荧光的水溶性荧光素和绿脓素等，在血平板上会出现透明溶血环。铜绿假单胞菌中含有H抗原和O抗原。O抗原包括两种，一种是脂多糖，具有特异性，一种是外膜蛋白，是一种保护性抗原。

2 铜绿假单胞菌的检测

2.1 标本采集

采集不同感染部位的标本，其中包括尿液、脓汁、血液、穿刺液、痰标本等，另外还有医院环境中的标本，包括空气、水、物体表面等。

2.2 染色镜检

铜绿假单胞菌是革兰阴性杆菌，它的菌体大小在长1.5~5.0um×宽0.5~1um，菌体细长，而且长短不一，有的情况下会呈现为线状或者球杆状，短链状或者成对排列，菌体的一端具有单鞭毛，没有荚膜，没有芽孢。

2.3 分离培养

铜绿假单胞菌的生长对营养要求很低。对于没有正常菌群存在的标本，比如穿刺液、血液等，可以接种铜绿假单胞菌培养基、血琼脂培养基或者普通全营养型培养基。对于有正常菌群存在的标本或者环境中的标本，可以接种选择性培养基。普通琼脂培养基上铜绿假单胞菌生长18~24h就会可以看到润湿、扁平的菌落，产生的带荧光的青脓素和绿脓素会结合，让培养基呈现亮绿色。在血琼脂平板上生长的时候就可以观察到菌落的周围产生溶血环，菌落呈现出金属光泽。铜绿假单胞菌培养基上菌落呈现出红褐色或者蓝绿色，在365nm的紫外灯下有荧光。如果铜绿假单胞菌是在液体培养基中生长，那么就会呈现出浑浊，在液体的表面会形成菌落，液体培养基底部的细菌则生长不良。

2.4 生长实验

铜绿假单胞菌在温度4-42℃下生长，在4℃的时候不生长，而在42℃的时候生长。

2.5 生化鉴定

标本中含有铜绿假单胞菌，那么触酶实验检测结果呈阳性，在365nm的紫外灯下显荧光，乙酰胺肉汤检测结果呈阳性。

2.6 分型

主要包括三种分型，分别是噬菌体分型、血清学分型以及质粒指纹图分析。其中噬菌体分型中，所应用的噬菌体有24株，分型率在90%。血清学分型中，可以分为20个血清型，利用O抗原进行分型。质粒指纹图分析是根据细菌携带质粒的情况进行分析。

3 检测出铜绿假单胞菌的时候临床上可以使用的抗生素

3.1 抗铜绿假单胞菌的青霉素

抗铜绿假单胞菌的青霉素主要有羧苄西林、替卡西林、哌拉西林。羧苄西林在临床治疗中活性较差，现在已经不用，替卡西林的活性比羧苄西林强2~4倍，哌拉西林是亲霉素类抗生素中活性最好的。

3.2 三代头孢

三代头孢包括头孢他啶、头孢哌酮、头孢匹胺。其中头孢他啶是头孢菌素类中活性最好的，在肠杆菌科细菌具有很高的活性，和阿米卡星或者妥布霉素联用对铜绿假单胞菌有明显的协同作用头孢哌酮对肠杆菌科细菌和革兰阳性菌的活性要比头孢噻肟等三代头孢的活性弱。头孢匹胺和头孢哌酮比较相似。

3.3 四代头孢-头孢吡肟

头孢吡肟对铜绿假单胞菌有很好的抗菌作用，对于肾功能减退的患者可以有效延长。

3.4 碳青霉烯类

碳青霉烯类主要包括亚胺培南、帕尼培南、美罗培南。亚胺培南对铜绿假单胞菌的活性和头孢他啶的相近。亚胺培南对哌拉西林有拮抗作用，两者不可联用，而且癫痫患者不能选用亚胺培南。美罗培南对铜绿假单胞菌的活性是亚胺培南的2-4倍。

3.5 单环β内酰胺类抗生素

氨曲南对铜绿假单胞菌的活性和哌拉西林与头孢哌酮的相似，比头孢他啶的活性弱2-4倍。

3.6 氨基糖苷类抗生素

氨基糖苷类抗生素对铜绿假单胞菌有很长一段时间的抗生素后效应，对于病原菌还没有确定的严重感染者，在铜绿假单胞菌或者需氧革兰阴性杆菌引起的可能比较大的时候，可以将β类酰胺类抗生素和氨基糖苷类抗生素联合使用。也有学者认为，在开始治疗后的2-3天就可以停止使用氨基糖苷类抗生素，减少不良反应。

3.7 喹诺酮类抗生素

喹诺酮类抗生素主要有莫西沙星和环丙沙星，莫西沙星的效果比环丙沙星的效果差，主要是因为莫西沙星为了增加对肺炎链球菌的作用，降低了抗铜绿的作用。

3.8 黏菌素

黏菌素是治疗铜绿假单胞菌感染的最后选择，黏菌素具有肾毒性，而且神经毒性很严重。

综上所述，在感染铜绿假单胞菌的时候，需要根据实际情况选择抗生素，有一些抗生素不可联用，而且可供选择的抗生素有限。

参考文献：

[1] 郝士卿, 杨浩宁, 尤文文,等. 372株铜绿假单胞菌的临床分布特点及耐药性分析[J]. 临床合理用药杂志, 2017, 10(1):154-155.

[2] 房华, 汪瑞忠, 张晓雪, et al. 中西药联合对多重耐药铜绿假单胞菌体外抗菌作用研究[J]. 中国现代医生, 2017, 55(31):107-110.