沙门氏菌检验技术进展分享
王晓琴
达川区人民医院 四川 达州 635000
有报道称:在全世界的种类细菌性食物中毒,位于榜首会引起食物性中毒的细菌为沙门氏菌。沙门氏菌在我们国家的内陆地区也排名第一。沙门杆菌是革兰氏阴性肠道菌,被污染的食物和受感染人群会引起食物中毒反应、肠炎等,严重者也会导致死亡。近些年随着我国医疗技术的不断研究和对国外新技术的不断学习,针对沙门氏菌检验技术做了很多研究,本文为大家简单普及一些关于沙门氏菌的相关检验技术进展。
1 血清学鉴定方法
血清学检验的原理是通过抗原抗体和培养分离出来的不明细菌做血清学检验,出现的明显的凝集而产生的特异性反应[1]。这种鉴定方式的优点是效率高、时间快、敏感度高、特异性强。有媒体报道过鸡白痢沙门氏菌的检验方法,使用血清和需检查的血液做凝集试验,对检查鸡白痢沙门氏菌起到了简单、迅速、特异性的发展方向。
2 免疫标记技术
免疫标记技术指的是采取免疫酶、免疫荧光素和放射同位素技术来反应抗原抗体的标记。 免疫标记技术不光能增强抗原抗体敏感性,更是方便给检测物定量、定性达到更精准的检验。免疫标记技术是现在免疫学技术中应用最多的检验技术。检验沙门氏菌就重点的使用了免疫酶和免疫荧光素技术,对检查沙门氏菌起到了方便、敏感、迅速的发展方向[2]。以下对免疫酶、免疫荧光素和放射同位素检验技术的进展做具体的区分。
2.1 免疫酶技术
通过早期免疫酶检测,到现在的发展技术已经可以从白鼠身上克隆出伤寒沙门氏菌E23566菌株染色体, 并且免疫酶技术也应用在了食品检测沙门氏菌中。①有相关报道表明用白鼠的DNA中伤寒沙门氏菌和300种不同的沙门氏菌血清做交配检验,结果表明此方法能可以快速分出伤寒沙门氏菌,对进一步的种类鉴别起到了非常快速和方便的作用。②还有一种染色体图谱指纹法能够进一步对沙门氏菌的菌类不同做出鉴别。PCR试验是由DNA基因编码和所含有沙门氏菌的检测样品做排除试验。重点在于粪便需要做500倍以上的稀释后方可做PCR试验。特异性基因试验是由基因编码和已经取得的8种肠道菌类做沙门氏菌的特异性试验。以上两种试验虽然都是对进一步检查沙门氏菌的种类做鉴定, 但是还需要做大量的试验来支持。仍需大量的资料来进一步证实。由相关部门表示伤寒沙门氏菌是PCR和DNA检测中特有的基因,所以直接采取粪便来分析检测。PCR技术能够具有快速、简单、特异性和敏感性,对于比常规没有办法检测出来的分类更具优势,如果把此方法从试验中应用到临床上,那前景是不可限量的 [3]。
2.2 免疫荧光素标记技术
使用特异性抗原抗体和免疫荧光素相互作用而形成荧光反应。①检测沙门氏菌可采取吖啶橙免疫荧光菌检验法,结果表明此方法可以检查出每毫升的沙门氏菌中具有34个菌,和大肠杆菌、枯草杆菌等杂菌都不会产生反应,互相不干扰,并且实验时间在三十分钟内就可完成,大大减少的检验时间,还增强了特异性、灵敏度比较便捷。②检测沙门氏菌可以把菌吸附在检测玻片样本上,然后用免疫荧光显微镜来做检测。结果表明此方法可以检查出每毫升的沙门氏菌103.5个,没有出现假性。③检测沙门氏菌可采取自动荧光抗体检测系统,对食品里出现的沙门氏菌进行检测, 结果表明此方法能在60分钟里做120个玻片样本检测, 并且跟常规试验相比达到了96%的高准确率。④检测沙门氏菌除了应用免疫荧光素标记法,还可以对沙门氏菌中辛脂酶来采取Mucap荧光试验法做判断,因为沙门氏菌中有辛酯酶组成,所以针对辛脂酶来做荧光试验检测,在强光波的照射下会出现沙门氏菌特有的有很强的萤光反应。出现荧光反应只要几分钟的时间非常方便,对检测仪器也没有特别要求很适合基层使操作。
上述检测沙门氏菌的方法都是在较短的时间里能够快速并准且的进行检测,但是想要弄清楚沙门氏菌的种类和血型就需要做进一步的检查来判断。
2.3 血清型的研究
对沙门氏菌根据血清型采用分子生物学技术来做分析研究的报道目前还较少。具体包括了下面五个部分:①缺少两种菌第2相H抗原。②合并的两种H抗原,此菌包含了两个H抗原的基因。③H抗原的R相。由相关资料表明印尼检测的30株伤寒杆菌中就出现9株有着特异性的DNA模式。④无动力菌隐蔽的H抗原。有外国研究人员把雏沙门氏菌放在特殊的环境中进行培养, 其中在33株菌中培养成功了28株能在表面做移动, 并且培养环境、培养温度、糖的浓度与种类、琼脂浓度、都由很大的关系。从电镜中能看到很长的细鞭毛, 和肠炎沙门氏菌相比血清型数量比较少,与其他复合血清对比具有很强的凝集性。⑤突变的O抗原体 [4]。
通过上述不同方向的分析研究,关于沙门氏菌的检测技术都得到了很好的进展方向, 虽然有些检测技术已经在实际中得到了应用,还有些检测技术还不够成熟仍然要继续探索研究。也根据医疗免疫技术的不断创新,沙门氏菌检测技术也向好的方向发展中,会更加向着更具有特异性、快速、灵敏的方向发展。
参考文献:
[1] 游勇来.沙门氏菌的分离鉴定及PCR快速分型的研究[D].华南理工大学,2013.
[2] 汤旭,阮红.浅析食品中沙门氏菌的几种快速检验方法[J].疾病预防控制通报,2013,28(02):88-90.
[3] 郝书林,张亚南,王静.畜产品中沙门氏菌检验方法的研究进展[J].中国畜牧兽医文摘,2012,28(10):50.
[4] 陈伯祥.沙门氏菌检验技术的研究进展[J].国外畜牧学(猪与禽),2010,30(01):101-102.